cytotox CALUX® (BDS 027)
細胞毒性応答CALUX®（cytotox CALUX®）は、恒常的に活性化されたプロモーターに結合したホタルルシフェラーゼ遺伝子を組み込んだヒト骨肉腫細胞株U2OSを使用しています。この設定により、ルシフェラーゼが生成され、適切な基質を追加すると光を発します。細胞毒性化合物は、この信号を用量依存的に抑制します。この抑制は、細胞毒性の測定だけでなく、他の非特異的な影響を検出し、CALUXアッセイにおける非特異的な干渉を排除するためにも使用されます。参照化合物として使用されるのはトリブチルスズアセテートです。
| 仕様 | cytotox CALUX® |
| 基底細胞株 | U2OS |
| 種 | ヒト |
| 組織 | 骨肉腫 |
| 陽性対照 | トリブチルスズアセテート |
| エンドポイント（純粋化合物） | ECまたはPC濃度、最小効果濃度（例：PC10） |
| エンドポイント（混合物） | 毒性当量（pg TEQ/g処理サンプル） |
| テスト期間 | 24時間（インキュベーション時間） |
| 特異性 | 非特異的アッセイ干渉を排除するためのルシフェラーゼ活性の抑制 |
| アッセイ干渉 | 安定した校正的レポーター遺伝子発言の使用により最小限 |
| 感度（LOD/Q） | n.a. |
| 変動制 | …………… |
| Z係数 | …………… |
| マトリックス | あらゆるタイプのサンプル |
| サンプルの体積/質量 | マトリックスおよび所望の（定量限界）LOQに依存 |
| 化合物の量 | 通常は10mg。DMSOで提供される高効力化合物の場合はそれよりずっと低い。 |
| 評価基準 | 関連するアプリケーション/規制に準拠した社内方式。 |
| SOPとガイドライン | BDS内部 |
| HTSプロトコル | BDS; EURL‑ECVAM DB‑ALMプロトコル番号197を参照: 自動CALUX®レポーター遺伝子アッセイ手順 |
| 主な参考文献 | Van der Linden, SC, von Bergh A, Van Vugt-Lussenburg B, Jonker L, Brouwer A, Teunis M, Krul C and Van der Burg B. (2014) Development of a panel of high throughput reporter gene assays to detect genotoxicity and oxidative stress, Mutation Res.760,23-32. |